ໃນການສັງເຄາະ DNA, RNA ແລະການສັງເຄາະທີ່ບໍ່ແມ່ນທໍາມະຊາດ, ຂັ້ນຕອນ Deprotection ແລະ Coupling ມີບົດບາດສໍາຄັນ.
ຂັ້ນຕອນ Deprotection ແມ່ນເພື່ອເອົາກຸ່ມ DMT ເທິງການສະຫນັບສະຫນູນແຂງຫຼືກຸ່ມ 5' hydroxyl ໃນ nucleoside ທີ່ຜ່ານມາດ້ວຍອາຊິດອິນຊີ, ແລະເປີດເຜີຍກຸ່ມ hydroxyl ສໍາລັບຂັ້ນຕອນການເຊື່ອມດັ່ງຕໍ່ໄປນີ້.ອາຊິດ trichloroacetic 3% ໃນ dichloromethane ຫຼື toluene ສ່ວນໃຫຍ່ແມ່ນໃຊ້ເພື່ອປະຕິບັດຂັ້ນຕອນປ້ອງກັນ.ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງອາຊິດ trichloroacetic ແລະເວລາປ້ອງກັນ (ເວລາປ້ອງກັນ) ຄອບງໍາຄວາມບໍລິສຸດຂອງຜະລິດຕະພັນສຸດທ້າຍ.ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຕໍ່າແລະເວລາການປິດກັ້ນບໍ່ພຽງພໍເຮັດໃຫ້ກຸ່ມ DMT ທີ່ບໍ່ມີປະຕິກິລິຍາ, ເຊິ່ງເຮັດໃຫ້ຜົນຜະລິດຫຼຸດລົງແລະເພີ່ມຄວາມບໍ່ສະອາດທີ່ບໍ່ຕ້ອງການ.ທີ່ໃຊ້ເວລາ deblocking ຍາວອາດຈະເຮັດໃຫ້ depurine ຂອງລໍາດັບສັງເຄາະ, ປະກອບເປັນ impurities ບໍ່ໄດ້ຄາດຫວັງ.
ຂັ້ນຕອນ Coupling ມີຄວາມອ່ອນໄຫວຕໍ່ກັບເນື້ອໃນນ້ໍາຂອງສານລະລາຍແລະຄວາມຊຸ່ມຊື່ນໃນອາກາດ.ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງນ້ໍາໃນການສັງເຄາະຄວນຈະຫນ້ອຍກວ່າ 40 ppm, ດີກວ່າຫນ້ອຍກວ່າ 25 ppm.ເພື່ອຮັກສາສະພາບຂອງການສັງເຄາະທີ່ບໍ່ມີນ້ໍາ, ການສັງເຄາະອາຊິດນິວຄລີອິກຄວນໄດ້ຮັບການປະຕິບັດໃນສະພາບແວດລ້ອມທີ່ມີຄວາມຊຸ່ມຊື່ນຕ່ໍາ, ດັ່ງນັ້ນພວກເຮົາແນະນໍາໃຫ້ລູກຄ້າຂອງພວກເຮົານໍາໃຊ້.Amidites ອຸປະກອນການລະລາຍ, ເຊິ່ງສາມາດລະລາຍ Phosphoramidite ຜົງຫຼືໄຂມັນໃນ acetonitrile ທີ່ບໍ່ມີນ້ໍາເພື່ອຫຼີກເວັ້ນການສໍາຜັດກັບອາກາດ.
ນັບຕັ້ງແຕ່ການລະລາຍຂອງ phosphoramidites ມັນດີກວ່າໃນສະຖານະການທີ່ບໍ່ມີນ້ໍາ, ແລະກັບດັກໂມເລກຸນເພື່ອດູດຊຶມນ້ໍາຕາມຮອຍໃນ reagents ແລະ amidite, ມັນຈໍາເປັນຕ້ອງກະກຽມ.ກັບດັກໂມເລກຸນ.ພວກເຮົາແນະນໍາໃຫ້ 2 g subsieve ສໍາລັບ 50-250ml ຂວດ reagent, 5g ສໍາລັບ 250-500ml ຂວດ reagent, 10g ສໍາລັບ 500-1000ml ຂວດ reagent, ແລະ 20g ສໍາລັບ 1000-2000ml ຂວດ reagent.
ການລະລາຍຂອງ phosphoramidites ຄວນຖືກປະຕິບັດພາຍໃຕ້ບັນຍາກາດ inert, ແລະການທົດແທນຂອງ activator reagents ແລະ acetonitrile ຄວນສໍາເລັດໃນທີ່ໃຊ້ເວລາ.ຄວນໃຊ້ Capping ແລະ Oxidation reagents ໃຫ້ໄວເທົ່າທີ່ຈະໄວໄດ້, ທາດ reagents ທີ່ເປີດໃຫ້ອາຍຸການເກັບຮັກສາໜ້ອຍລົງ ແລະ ມີການເຄື່ອນໄຫວໜ້ອຍລົງໃນລະຫວ່າງການສັງເຄາະ.
ເວລາປະກາດ: ສິງຫາ-09-2022