ອຸ​ປະ​ກອນ​ການ​ບໍ​ລິ​ການ​ສໍາ​ລັບ​ການ​ເຮັດ​ໃຫ້​ບໍ​ລິ Oligo​

1. Gel Electrophoresis Chromatography Purification
ໃຊ້ denaturing polyacrylamide gel electrophoresis chromatography ສໍາລັບການຊໍາລະລ້າງ.ຕົວແທນ denaturing ໂດຍທົ່ວໄປແມ່ນ 4M formamide ຫຼື 7M urea, ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງ acrylamide ແມ່ນລະຫວ່າງ 5-15%, ແລະອັດຕາສ່ວນຂອງ methacrylamide ສ່ວນໃຫຍ່ແມ່ນຢູ່ລະຫວ່າງ 2-10%.
ຫຼັງຈາກ electrophoresis, ຕໍາແຫນ່ງຂອງແຖບອາຊິດ nucleic ຕ້ອງໄດ້ຮັບການກໍານົດພາຍໃຕ້ການ irradiation ຂອງແສງ ultraviolet, gel ທີ່ມີອາຊິດ nucleic ເປົ້າຫມາຍໄດ້ຖືກຕັດອອກ, ອາຊິດ nucleic ຖືກຕີແລະ leached, ແລະຫຼັງຈາກນັ້ນການແກ້ໄຂ leaching ແມ່ນເຂັ້ມຂຸ້ນ, desalted, ປະລິມານແລະ lyophilized.

2. DMT-On, HPLC Purification
ເລືອກໂຫມດ DMT-On ໃນລະຫວ່າງການສັງເຄາະ, ຜະລິດຕະພັນນ້ໍາມັນດິບໄດ້ຖືກສູນກາງແລະມີຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຢູ່ໃນອຸນຫະພູມຫ້ອງເພື່ອເອົາແອມໂມເນຍເກີນຫຼັງຈາກ aminolysis.
ການແຍກໄດ້ຖືກປະຕິບັດໂດຍໃຊ້ຖັນ C18 ທີ່ມີ acetonitrile ແລະ 10% triethylamine-acetic acid (TEAA) ເປັນ eluent.ຫຼັງຈາກ elution ສໍາເລັດ, ມັນມີຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນ, ແລະຫຼັງຈາກນັ້ນກຸ່ມ DMT ໄດ້ຖືກໂຍກຍ້າຍອອກດ້ວຍອາຊິດ trifluoroacetic.ຫຼັງ​ຈາກ​ການ​ເປັນ​ກາງ​, ເກືອ​ບາງ​ແລະ​ໂມ​ເລ​ກຸນ​ຂະ​ຫນາດ​ນ້ອຍ​ໄດ້​ຖືກ​ໂຍກ​ຍ້າຍ​ອອກ​ໂດຍ​ຜ່ານ​ທໍ່​ທີ່​ຕັດ​ອອກ​, ແລະ​ສຸດ​ທ້າຍ desaled​.

ວິທີການນີ້ສາມາດໄດ້ຮັບຜະລິດຕະພັນທີ່ມີຄວາມບໍລິສຸດສູງກວ່າ, ແຕ່ມັນຈໍາເປັນຕ້ອງເອົາໃຈໃສ່ກັບການປະກົດຕົວຂອງ depurination.

3. DMT-Off, HPLC Purification
ເລືອກ DMT-Off ໃນລະຫວ່າງການສັງເຄາະ, ແລະຜະລິດຕະພັນນ້ໍາມັນດິບໄດ້ຖືກຈຸດສູນກາງແລະມີຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຢູ່ໃນອຸນຫະພູມຫ້ອງເພື່ອເອົາແອມໂມເນຍເກີນຫຼັງຈາກ ammonolysis.
ການແຍກໄດ້ຖືກປະຕິບັດໂດຍໃຊ້ຖັນ C18 ກັບ acetonitrile ແລະ 10% triethylamine-acetic acid ໃນນ້ໍາເປັນ eluent.ຫຼັງຈາກການແຍກຕ່າງຫາກໄດ້ຖືກສໍາເລັດແລະປະລິມານ, aliquots ແມ່ນ lyophilized.

ວິທີການນີ້ຮຽກຮ້ອງໃຫ້ມີການປັບຕົວຢ່າງລະອຽດຂອງເງື່ອນໄຂການແຍກ, ແລະຍັງສາມາດໄດ້ຮັບໂມເລກຸນເປົ້າຫມາຍທີ່ຂ້ອນຂ້າງ.